Esta es una máquina usada para hacer espectroscopia de RMN. La mayoría de estas máquinas usan imanes de 500 megahertz a 900 megahertz. Este imán es de 900 megahertz.

La RMN permite obtener información estructural y dinámica tridimensional en condiciones lo más parecidas posible a las fisiológicas.y las interacciones transitorias proteína-proteína pueden ser investigadas.

¿Qué es la espectroscopia NMR y cómo funciona?

La espectroscopia de RMN funciona usando los imanes naturales, los núcleos de ciertos átomos, dentro de las proteínas.El gran imán obliga a los imanes de las proteínas a alinearseLuego, los investigadores explotan la muestra con una serie de pulsos de onda de radio de fracciones de segundo y observan cómo responden los imanes de la proteína.Los científicos usan varios conjuntos de estas explosiones de RMN y combinan los datos para obtener una imagen más completa de la proteínaAunque la cristalografía de rayos X puede examinar proteínas más grandes que la RMN, la tecnología RMN puede estudiar proteínas sumergidas en soluciones líquidas.La cristalografía de rayos X requiere que las proteínas estén organizadas en cristales.

Introducción:

La resonancia magnética nuclear (RMN) se ha convertido en la principal técnica para obtener información estructural a resolución atómica en solución sobre macromoléculas como proteínas y ácidos nucleicos.Solución RMN es una tecnología indispensable para determinar no sólo las estructuras de tales moléculas, sino también sus interaccionesEl poder de la RMN reside en la vinculación de procesos estructurales, dinámicos,la información cinética y termodinámica para convertirla en una técnica de elección en la investigación de vanguardia en medicina y biología.

NMR de la solución:

La solución NMR dentro de Instruct proporciona un enfoque importante para obtener la información a nivel molecular necesaria para construir redes de interacciones responsables de procesos celulares vitales,y describirlos a nivel molecularGracias a los recientes desarrollos de hardware y software, su aplicabilidad abarca desde estructuras supramoleculares hasta proteínas intrínsecamente desplegadas en concentraciones casi fisiológicas.La RMN de solución ofrece posibilidades únicas para estudiar procesos dinámicos a resolución atómica y en un rango de tiempo muy amplio, desde picosegundos hasta horas, incluidos los mecanismos de plegamiento y la formación transitoria de complejos.

NMR en estado sólido:

Si bien la RMN en solución es ya una técnica bien establecida para la determinación estructural de biomoléculas en solución,La RMN en estado sólido ha experimentado enormes avances metodológicos y técnicos en la última década, y está alcanzando el estatus de una técnica poderosa para la investigación mecanicista y estructural de sólidos biológicos.La RMN en estado líquido de SS no tiene las limitaciones impuestas a la RMN en estado líquido por el tamaño del sistema investigado, y puede manejar sistemas moleculares que no son susceptibles a estudios de rayos X, como agregados e fibrillas insolubles.Casi todos los días se descubren nuevas y emocionantes posibilidades y se espera que la RMN SS abra nuevas vías para la biología moderna en un futuro próximo..

La RMN SS dentro de Instruct proporciona una herramienta invaluable para la determinación de la estructura y la dinámica de los sistemas que están más allá del alcance de otros métodos estructurales.que van desde proteínas de membrana hasta materiales nanocristalinos y agregados e fibrillas insolublesLos instrumentos y protocolos experimentales de última generación permiten determinar una serie de parámetros biofísicos que permiten, junto con la determinación estructural, determinar la composición de la superficie de la Tierra.la caracterización de la dinámica interna y global del sistema en detalle atómicoEstas características hacen de la RMN SS una técnica vital en biología estructural.

Relaxometría de ciclismo de campo rápido:

La relaxometría de ciclo de campo rápido es una herramienta para medir las tasas de relajación nuclear desde campos magnéticos muy bajos (0,01 MHz de frecuencia de protón Larmor) hasta 1 T (aproximadamente 45 MHz de frecuencia de protón Larmor).La dependencia de campo de las tasas de relajación proporciona información sobre las características estructurales y dinámicas de la molécula y, en el caso de los sistemas paramagnéticos, en la relajación del electrón.

Las mediciones de relaxometría se realizan generalmente en soluciones acuosas.y por lo tanto sobre el tiempo de reorientación y estado de agregación del sistemaLas mediciones de relaxometría pueden ser útiles para determinar la presencia de unión entre macromoléculas o entre un pequeño complejo paramagnético y una macromolécula.así como para estudiar los mecanismos responsables de la relajación de electronesSe utiliza en gran medida para la caracterización de agentes de contraste para imágenes por resonancia magnética (IRM) y para su optimización.Esta técnica también se aplica con éxito a la caracterización de radicales para aplicaciones a la polarización nuclear dinámica (DNP).

Resonancia electrónica paramagnética (EPR):

La Resonancia Paramagnética Electrónica (EPR) mide la absorción de la radiación electromagnética por un sistema paramagnético colocado en un campo magnético estático.Las aplicaciones estándar de EPR incluyen la caracterización de los radicales libres, estudios de reacciones que involucran radicales/metales paramagnéticos, y investigaciones de las propiedades electrónicas y estructurales de los centros paramagnéticos.En sistemas biológicos complejos con centros paramagnéticos estables o transitorios (que pueden ser iones metálicos o grupos, etiquetas de espín, radicales de aminoácidos o radicales de cofactores orgánicos) EPR se utiliza para estudiar la disposición de cofactores y subunidades, la formación de elementos estructurales secundarios,o las interacciones entre biomoléculas.

La información obtenida se utiliza en la determinación de la estructura molecular. La precisión de esta información estructural a menudo supera la de otros métodos.Los datos espectroscópicos del EPR proporcionan la única información estructural, en particular cuando los cristales de alta resolución no están disponibles y los sistemas son demasiado grandes para la espectroscopia NMR de alta resolución.Los datos de EPR pueden complementar la información obtenida mediante otras metodologías estructurales, y ha demostrado ser una técnica esencial para las investigaciones interdisciplinarias de los sistemas biológicos.

¿Qué podemos hacer con RMN?

• Peptides are a growing class of therapeutics and defined by the US Food and Drug Administration (FDA) as a polymer composed of 40 or fewer amino acid residues regardless of source or origin of the drug.
• Los péptidos pueden adoptar estructuras de orden superior (HOS) que incluyen formas estructurales secundarias, terciarias y cuaternarias (es decir, oligómeros en solución).El HOS es un atributo de calidad física de los péptidos formuladosPuede existir un equilibrio entre diferentes formas de HOS, incluido el intercambio conformacional entre estados plegados y desplegados y entre estados monoméricos y oligoméricos.
• Los medicamentos a base de proteínas presentan un reto para la revisión de la calidad debido a sus formulaciones complejas y a la heterogeneidad inherente en las estructuras de las proteínas.Se necesitan métodos analíticos de mayor resolución para garantizar las similitudes estructurales y de composición entre los productos proteicos terapéuticos que contienen la misma sustancia farmacológicaAdemás de la estructura de orden superior de la proteína probada por RMN, dicroísmo circular (CD) u otros enfoques, la agregación de proteínas sub-visibles presenta un riesgo de inmunogenicidad para la seguridad de los medicamentos.
• Debido a que la resonancia magnética nuclear (RMN) ha sido el único método espectroscópico de resolución atómica para derivar la estructura tridimensional de los péptidos en solución,sirve como un enfoque de vanguardia para la medición de la similitud de HOS..

Análisis NMR del péptido KS-VPlataforma de servicios:

• Evaluación avanzada de la consistencia estructural de los medicamentos genéricos de péptidos o de sus análogos biológicos: incluida la comparación cualitativa de espectros y diversos modelos de comparación cuantitativa como el CCSD,análisis quimiométrico (PCA y cálculo de la distancia), regresión lineal, método de contorno de pico de correlación 2D, utilizado para la aplicación de la FDA.
• Asignación por cambios químicos de péptidos
• Análisis de la localización de los enlaces disulfurados en las drogas pépticas
• Análisis de la estructura de la solución y cálculo de los péptidos
• Identificación de las estructuras de impurezas en las drogas peptídicas sintéticas
• Interacciones con ligandos de proteínas, tales como titulación magnética nuclear, ETS, WATERLOGSY